ITALIANO

Concetti e conoscenze di base delle principali tecniche molecolari in uso in diagnostica nei laboratori di Patologia clinica

M. Cioffi “Manuale di diagnostica di laboratorio” Minerva medica
T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET

Il corso ha l’obiettivo di consentire allo studente di conoscere le principali tecniche molecolari utilizzate per la determinazione di mutazioni e polimorfismi noti coinvolti in varie patologie, per screening mutazionali, nella diagnosi di microrganismi e nella diagnosi della resistenza ai farmaci

- Fondamenti di fisica e chimica generale
- Fondamenti di biologia e biochimica
- Fondamenti di fisiologia
- Fondamenti di microbiologia

Il Corso sarà svolto con lezioni frontali

La verifica dell’apprendimento sarà effettuata mediante un colloquio orale, volto ad accertare le conoscenze degli argomenti affrontati durante il corso

Per chiarimenti e problematiche inerenti agli argomenti dell’ insegnamento gli studenti possono rivolgersi al docente di riferimento secondo le modalità di ricevimento indicate nella pagina web

1. Estrazione, precipitazione, separazione analitica e dosaggio degli acidi nucleici

2. PCR (Polymerase Chain Reaction). Amplificazione nested. Multiplex PCR

3. RT-PCR (Reverse Transcription-PCR)

4. Real-time PCR

5. Strategie per la determinazione di mutazioni e polimorfismi:
PCR-CTPP (PCR-Confronting Two Pair Primers)
PCR-ARMS (PCR-Amplification Refractory Mutation System)
PCR-reverse dot-blot
Enzimi di restrizione e loro applicazione nella diagnosi di mutazioni, PCR-RFLP (PCR- restriction fragment length polymorphism)

6. La PCR nella diagnostica microbiologica

7. Determinazione della sequenza di un acido nucleico mediante Sequenziamento automatico diretto (Metodo di Sanger)

8. Next Generation Sequencing (NGS)

9. Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA) per analisi di riarrangiamenti

Italian

Basic concepts and knowledge of the main molecular techniques used in diagnostics in Clinical Pathology laboratories

T. Strachan A.P. Read. “Genetica umana molecolare” UTET English version

The course aims to enable students to become familiar with the main molecular techniques used for the identification of known mutations and polymorphisms involved in various diseases, for mutational screening, in the diagnosis of microorganisms, and in the diagnosis of drug resistance.

Fundamentals of Physics and General Chemistry

Fundamentals of Biology and Biochemistry


Fundamentals of Physiology


Fundamentals of Microbiology

The course will consist of lectures.

The assessment of learning will be carried out through an oral examination, aimed at verifying knowledge of the topics covered during the course.

or clarifications and issues related to the course topics, students may contact the lecturer in charge according to the office hours and procedures indicated on the webpage.

ranslation into English:

Extraction, precipitation, analytical separation, and quantification of nucleic acids

PCR (Polymerase Chain Reaction). Nested amplification. Multiplex PCR

RT-PCR (Reverse Transcription PCR)

Real-time PCR

Strategies for the determination of mutations and polymorphisms:

PCR-CTPP (PCR–Confronting Two-Pair Primers)

PCR-ARMS (PCR–Amplification Refractory Mutation System)

PCR reverse dot-blot

Restriction enzymes and their application in mutation diagnosis, PCR-RFLP (PCR–Restriction Fragment Length Polymorphism)

PCR in microbiological diagnostics

Determination of nucleic acid sequence by direct automated sequencing (Sanger method)

Next Generation Sequencing (NGS)

Multiplex Ligation-Dependent Probe Amplification (MLPA) for the analysis of genomic rearrangements